题目列表(包括答案和解析)
是鲜味剂味精的主要成分,以前用植物(如大豆)蛋白质水解法生产。1957年,日本率先用微生物发酵法生产成功。常用的谷氨酸产生菌有 棒状杆菌、黄色短杆菌等。培养基通常用豆饼(或马铃薯等)的水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、氧化钾、硫酸镁、生物素等配制而成,呈 状态,因此也称培养液。其中的 是生长因子。培养液配制完成以后,投放到发酵罐中,通入98kPa的蒸汽进行灭菌,冷却后,在无菌条件下加入菌种,即为 。
发酵罐是一种圆柱形的容器,容量从几升到几百万升不等,上面连接有 、 、接种、加料、冷却等装置;此外,还有对 、 、通气量与转速等发酵条件进行检测和控制的装置。
谷氨酸棒状杆菌是 菌,因此,发酵过程要不断地通入 空气,并通过 ,使空气形成细小的气泡,迅速溶解在培养液中(称 );同时,也能使菌种与培养液充分接触,提高它们对原料的 。在温度为30-37℃、pH为7-8.0的条件下,经28-32h,培养液中就会生成大量的谷氨酸。最后,将谷氨酸从培养液中分离提取出来,通常每升培养液中能得到谷氨酸50-100g。提取出来的谷氨酸用适量的Na2CO3溶液中和后,再经过过滤、浓缩、离心分离等步骤,便制成了味精。
1857年,法国微生物学家 发现了发酵原理,人们才认识到 是微生物活动的结果。
2、影响微生物生长的环境因素
环境中影响微生物生长的因素很多,主要的有温度、pH和氧。
温度 每种微生物只能在一定的温度范围内生长,其中,微生物生长 时的温度叫最适生长温度,绝大多数微生物的最适生长温度为 。在最适生长温度范围内,微生物的生长速率随温度的上升而 。超过最适生长温度以后,微生物的生长速率会急剧下降,这是由于细胞内的 和 等发生了不 的破坏。
pH 每种微生物的最适pH不同,如多数细菌的最适pH为6.5-7.5,真菌的最适pH为5.0-6.0。超过最适pH范围以后,就会影响酶的 ,细胞 的稳定性等,从而影响微生物对营养物质的 等。
氧 有些种类的微生物只能生活在有氧的条件下,如多种细菌和大多数真菌等好氧型微生物。有些种类的微生物在生活过程中不需要氧气,属于厌氧型微生物,如某些链球菌等。有些厌氧型微生物甚至是严格厌氧的,它们即使短时间接触空气,也会造成生长停滞,甚至导致死亡,如某些产甲烷杆菌。在自然界中,还有一类兼性厌氧微生物,它们在有氧和无氧条件下,能以不同的代谢方式生长繁殖,如 。可见,环境中氧 的状况,对不同代谢类型的微生物群体的生长,具有不同的影响。
在代谢的基础上,微生物的个体会由小到大不断地生长。但是,对于单细胞微生物来说,个体的生长很不明显,持续很短时间就开始繁殖,而且生长和繁殖交替进行,界限难以划清。因此,在实际工作中,常以微生物的 为单位来研究微生物的生长。
1、微生物群体生长的规律
下面以细菌为例讲述微生物群体生长的规律。将少量的某种细菌接种到恒定容积的液体培养基中,定时取样测定培养基里的细菌数目。然后,以时间为横坐标,以细菌数目的对数为纵坐标作图,便可以得到反映细菌生长规律的曲线,叫做生长曲线。从图中可以看出,细菌群体从开始生长到死亡的动态变化可以分为以下四个主要时期。
调整期 刚刚接种到培养基上的细菌,对新环境有一个短暂的 或适应过程,因此,一般不立即开始 ,这段时间称为调整期。这时细菌的代谢 ,体积增长 ,大量合成细胞 所需的酶类、ATP以及其他细胞成分。调整期的长短与菌种、培养条件等因素有关。
对数期 这个时期的细菌进入 分裂阶段,细胞数目以 数列的形式增加。一个细菌繁殖n代,可以产生2n个细菌。处于对数期的细菌,代谢 ,个体的形态和 比较稳定,常作为生产用的 (也叫种子)和科研的材料。
稳定期 经过一段时间的高速生长以后,随着营养物质的 ,有害代谢产物的 ,pH的变化等,细菌的分裂速率 ,死亡细胞的数目逐渐增加,整个培养基中新增加的细胞数和死亡的细胞数达到 ,这个时期称为稳定期。在稳定期,活菌数目达到 ,细胞内大量积累代谢产物,特别是 代谢产物,某些细菌的 也是在这个时期形成的。
衰亡期 随着培养的继续,细菌的死亡速率 繁殖速率,最终导致培养基中的活菌数目急剧下降,这个时期称为衰亡期。到了衰亡期,细胞会出现多种形态,甚至 ,有些细胞开始解体, 出代谢产物等。
认识和掌握微生物的生长曲线,具有重要的实践意义。例如,处于对数期的细菌,生长繁殖速率快,代谢旺盛,因此,生产上常用这个时期的细菌作为菌种,以缩短生产周期。又如,进入稳定期后,抗生素等代谢产物逐渐增多,这时如果适当补充营养物质,就有助于延长稳定期、提高代谢产物的产量。为此,人们经过长期的探索,总结出一种连续培养的方法,就是在一个流动装置中(如图),以一定的速度不断地添加新的培养基,同时又以同样的速度不断地放出老的培养基,以保证微生物对营养物质的需要,并排出部分有害代谢产物,使微生物保持较长时间的高速生长。目前,这种方法已成功地应用于酒精、丙酮、丁醇等产品的生产中。连续培养缩短了培养周期,提高了设备利用率,并且便于自动化管理。
3、微生物代谢的人工控制
人工控制微生物代谢的措施包括改变微生物 特性、控制生产过程中的各种条件(即 条件)等。
在生产实际中,人们将通过微生物的培养,大量生产各种代谢产物的过程叫做 。发酵的种类很多。根据培养基的 状态,可以分为固体发酵和液体发酵;根据所生成的 ,可以分为抗生素发酵、维生素发酵、氨基酸发酵等;根据发酵过程对 的需求情况,可以分为厌氧发酵(如酒精发酵、乳酸发酵)和需氧发酵(如抗生素发酵、氨基酸发酵)。
2、微生物代谢的调节
酶合成的调节 微生物细胞内的酶可以分为 酶和 酶两类。组成酶是微生物细胞内 存在的酶,它们的合成 受遗传物质的控制,而诱导酶则是在环境中 物质的情况下才能够合成的酶。例如,在用葡萄糖和乳糖作碳源的培养基上培养大肠杆菌,开始时,大肠杆菌只能利用葡萄糖而不能利用乳糖,只有当葡萄糖被消耗完毕以后,大肠杆菌才开始利用乳糖。这个实验表明,大肠杆菌分解葡萄糖的酶是 酶,分解乳糖的酶不是组成酶,而是在乳糖诱导下合成的 酶。这种调节既保证了代谢的需要,又避免了细胞内物质和能量的 ,增强了微生物对环境的 。
酶活性的调节 微生物还能够通过 酶的催化 来调节代谢的 。例如,谷氨酸棒状杆菌能够利用葡萄糖,经过复杂的代谢过程形成谷氨酸;但当终产物--谷氨酸的合成过量时,就会 谷氨酸脱氢酶的活性,从而导致合成途径中断。当谷氨酸因消耗而浓度下降时,抑制作用就会被解除,该合成反应又重新启动。因此,酶活性的调节是一种 、 的调节方式。这种调节现象在 、 的合成代谢中十分普遍。
上述两种调节方式是同时 ,并且密切配合、协调起作用的。通过对代谢的调节,微生物细胞内一般不会 大量的代谢产物。但在工业生产中,人们总希望微生物能够最大限度地积累对人类有用的代谢产物,这就需要对微生物代谢的调节进行人工控制。
1、微生物的代谢产物
微生物在代谢过程中,会产生多种的代谢产物。根据代谢产物与微生物生长繁殖的关系,可以分为 代谢产物和 代谢产物两类。
初级代谢产物是指微生物生长和繁殖所 的物质,如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、 等。在不同种类的微生物细胞中,初级代谢产物的种类 。此外,初级代谢产物的合成在 进行着,任何一种产物的合成发生障碍都会影响微生物正常的生命活动,甚至导致死亡。
次级代谢产物是指微生物生长到 才产生的化学结构十分复杂、对该微生物 生理功能,或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质,如 素、 素、 素、 素等。不同种类的微生物所产生的次级代谢产物 ,它们可能 在细胞内,也可能排到 中。其中, 是一类具有特异性 菌和
菌作用的有机化合物,种类很多,常用的有链霉素、青霉素、红霉素和四环素等。
3、培养基的种类
根据物理性质的不同,可以将培养基分为 培养基、半固体培养基和 培养基。固体和半固体培养基需加入凝固剂,如 。固体培养基主要用于 ,半固体培养基主要用于 ,液体培养基常用于 。
根据培养基的化学成分,可以将培养基分为 培养基、 培养基。 培养基的化学成分己知,常用于 , 培养基用化学成分不明确的天然物质配成,常用于 。
根据用途的不同,可以将培养基分为 培养基、 培养基等。选择培养基是在培养基中加入某种化学物质,以 不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。例如,当需要酵母菌和霉菌时,可以在培养基中加入 ,以抑制细菌、放线菌的生长,从而分离到酵母菌和霉菌。又如,在培养基中加入高浓度的 可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,从而可以将该菌分离出来。鉴别培养基是根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种 或化学药品配制而成的,用以 不同种类的微生物。例如,在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在 等细菌:如果有大肠杆菌,其代谢产物就与 结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。
二 微生物的代谢
微生物的个体虽小,但表面积与体积的比很大,这使微生物能够迅速与外界环境进行 ,也使它们的代谢活动异常 。
2、培养基的配制原则
在配制培养基时,要注意以下几点:第一,目的明确。应当根据不同种类微生物的营养需要选择不同的原料配制培养基。第二,营养要协调。不同种类的微生物对各种营养物质的需要量不同,配制培养基时要注意各种营养物质的 和 。第三,pH要适宜。各种微生物所要求的最适pH不同,细菌的最适pH为 ,放线菌的最适pH为 ,真菌的最适pH为 。
1、微生物需要的营养物质及功能
微生物细胞的化学组成与其他生物的 相同,也是由C、H、O、N、P、S以及其他元素组成,其中C、H、O、N占细胞干重的90%以上,这些元素最终来自外界环境中的各种无机和有机化合物。这里将这些化合物归纳成 、 、 、无机盐和水这 大类营养要素物质。
碳源 凡是能为微生物提供所需碳元素的 物质,就叫做碳源。在自然界,从CO2、NaHCO3等含碳无机物,到糖类、脂肪酸等含碳有机物,甚至花生粉饼、石油等成分复杂的天然物质,都可以作为微生物的碳源。其中, 是最常用的碳源,尤其是 。碳源主要用于 微生物的细胞物质和一些代谢产物,有些碳源还是异养微生物的主要 物质,因此微生物对碳源的需要量最大。
氮源 凡是能为微生物提供所需氮元素的营养物质,就叫做氮源。可以作为微生物氮源的营养物质很多,有分子态氮、氨、铵盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏和蛋白胨等。其中 、 等是最常用的氮源。氮源主要用于合成 、 以及含氮的代谢产物。对于 微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。
生长因子 生长因子是指微生物生长不可缺少的 物,主要包括 、 和碱基等,它们一般是 、 等的组成成分。有些微生物 需要补充生长因子,如大肠杆菌;而有些微生物则必须补充生长因子才能 生长,如乳酸杆菌就需要补充多种维生素和氨基酸。
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