6. (2010·浙江绍兴模拟)现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图l。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。下列相关叙述正确的是

A．酶H有2个识别位点和切割位点

B．酶B和酶H同时切割时，有3个识别位点和切割位点

C．酶B和酶H同时切割时，能产生完全相同的酶切片段

D．酶B和酶H有相同的识别和切割位点

[答案] B

[解析] 此题考查的是限制性内切酶的应用和DNA的基本结构知识，属于考纲理解、分析推断层次。长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子, 用酶H单独酶切，结果如图l A，由此判断酶H有1个识别位点和切割位点；用酶B单独酶切，结果如图2，由此判断酶B将其切割和有2个识别和切割位点，结果得到3个DNA片段；用酶H和酶B同时酶切，结果如图3，得到了上中不同碱基的片段，由于DNA碱基不用因为切割而变化，这样分析得到1个1400 bp片段，2个600 bp片段和1个400 bp片段，这样两种酶共同切割就得到了4个片段；有以上分析知道酶B和酶H同时切割时，能产生两个碱基都是600pb的DNA分子，但是不能理解为完全相同的酶切片段，因为DNA的组成不只有碱基的数量决定，海域碱基的种类和排列顺序有关；酶B和酶H有相同的切割位点，但并不能认为二者有相同的识别位点。

5. (2010·广州一模)利用植物修复技术治理重金属污染的实质是将某种特定的植物种植在被重金属污染的土壤上，植物收获后进行妥善处理，就可将重金属移出土体。目前科学家正尝试应用生物工程技术培育符合植物修复技术要求的转基因植物。请根据以上材料回答下列问题：

(1)土壤中的重金属通过　　　　　　　　　 逐级富集，从而危及人类的健康。

(2)在应用植物修复技术治理重金属污染的土壤时，需选择符合要求的植物，这遵循了生态工程的　　　　　　　　　　　 　　　原理。

(3)获得目的基因后可采用　　　　　　 技术进行扩增。大部分物种的基因能拼接在一起，是因为它们的分子结构都是　　　　　 结构。检测目的基因是否成功导入植物细胞，可采用的生物技术是　　　　　　　　　　　　　 。

(4)将含有目的基因的植物细胞培养成植株需要应用　　　　　　　　　 技术，该技术的理论依据是　　　　　　 ，在培养过程中，细胞必须经过　　　　　　　　　 过程才能形成胚状体或从芽。

　[答案] (1)食物链　 (2)协调与平衡原理

(3)PCR(多聚酶链式反应、聚合酶链式反应)　　 双螺旋　 DNA分子杂交技术

(4)植物组织培养　　 植物细胞的全能性　　　 脱分化和再分化　　　

[解析] 本题考查的是基因工程、植物的组织培养、生态工程及必修本的核心概念、原理及主要观点，属于考纲理解能力和综合运用能力考查。(1)生物的富集作用又叫生物浓缩，是指生物体通过对环境中某些元素或难以分解的化合物的积累，并通过食物链在生物间传递，并且浓度逐步增高；水体富营养化是一种氮、磷等营养物质含量过多所引起的藻类植物大量繁殖、水质污染现象。

(2)在应用植物修复技术治理重金属污染的土壤时，需选择符合要求的植物，这遵循了生态工程的协调与平衡原理。

(3)扩增目的基因采用多聚酶链式反应技术(PCR技术)进行；由于大部分物种的基因分子结构都是双螺旋结构所以能拼接在一起；检测目的基因是否成功导入植物细胞，可采用的生物技术是DNA分子杂交技术、DNA-RNA分子杂交技术、抗原抗体杂交等技术。

(4)将含有目的基因的植物细胞培养成植株需要应用植物组织培养技术，该技术的理论依据是植物细胞的全能性，在培养过程中，细胞必须经过脱分化和再分化过程才能形成胚状体或从芽。

4. (2010黑龙江适应考试)

　　 用多倍体育种的方法培育三倍体无子西瓜，每年都要制种，很麻烦。某活动小组的同学们，想到了利用植物组织培养的方法来解决此难题。请回答与此实验相关的问题。

　(1)此方法依据的原理是___________。选取合适的外植体作为起始材料，并要对外植体进行___________ (灭菌、消毒)。

　(2)超净工作台是植物组织培养重要的用具，在使用前可以用进行消毒接种前还要用___________擦拭工作台。

　　 (3)离体的组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配置适宜的培养基。常用的一种培养基是___________，其主要成分包括：___________、___________微量元素、有机物。还常常需要添加___________。对培养基应采用___________方法灭菌。需要的环境条件有___________ 。

　　 (4)如果外植体选取附材料为茎段，插入培养基时应注意___________ 。培养一段时间后，会通过___________形成愈伤组织，愈伤组织细胞的特点___________。

　[答案] (1)植物细胞的全能性　 消毒　 (2)紫外线　　 70%的酒精　

(3)MS培养基　 大量元素　 植物激素　 高压蒸汽灭菌　 温度、pH、光照(各1分)　

(4)方向不能倒插　 细胞分裂(脱分化或去分化)　 排列疏松而无规则(或高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞2分)

[解析] 此题考查的是植物的组织培养、微生物的分离和培养，属于考纲理解层次。 　(1)根据题中信息，可以判断出此方法为植物组织培养，因此依据的原理是植物细胞的全能性。选取合适的外植体作为起始材料，并要对外植体进行消毒。

　(2)超净工作台等操作用具，在使用前可以用紫外线进行消毒接种前还要用70%的酒精擦拭工作台。

　　 (3)离体的组织和细胞培养时，常用的一种培养基是MS培养基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有机物。还常常需要添加植物激素。对培养基应采用高压蒸汽灭菌方法灭菌。需要的环境条件有温度、pH、光照。

　　 (4)如果外植体选取附材料为茎段，插入培养基时应注意方向不能倒插。培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织，愈伤组织细胞的特点排列疏松而无规则。

3. (2010·南通市三模)下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述，不正确的是

A．提取动物细胞中的DNA和蛋白质都可以采用蒸馏水涨破细胞的方法

B．采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质

C．蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质

D．血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化，DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化

　[知能定位] 本题考查选修1教材中的DNA与蛋白质技术的相关知识。

　[答案]　 D

[解析] 理解DNA提取的原理和蛋白质分离的原理。 A项正确，提取动物细胞中的DNA和蛋白质都可以采用蒸馏水涨破细胞，其中提取动物细胞中的蛋白质除加入蒸馏水外还可加入甲苯，甲苯起溶解细胞膜的作用。B项正确：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液总的溶解度不同。C项正确：透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。D项血红蛋白的纯化也可采用透析、电泳等方法进行纯化。

2. (2010·浙江衢州市质检)科学家利用基因工程培育出了耐盐的转基因水稻新品系。下列叙述错误的是

　　 A．目前还不能用化学方法合成目的基因

　　 B．可通过农杆菌的感染以实现重组质粒导入受体细胞

　　 C．含耐盐基因的水稻细胞可经植物组织培养获得植株

　　 D．可用较高浓度的盐水浇灌来鉴定水稻植株的耐盐性

　[答案]A

[解析] 本题考查基因工程里，目的基因的获取途径、基因工程的步骤、植物组织培养的应用，属于识记层次。A、目的基因是可以用人工合成的方法获取的，如人胰岛素基因；B、植物外源基因导入可以用农杆菌；C、离体的组织或细胞可经过植物组培克隆出植株；D、用较高浓度的盐水浇灌来鉴定水稻植株的耐盐性是筛选转基因生物的方法之一

3.原书留空，现仍留空待补

1. (2010·山东潍坊模拟)基因剔除技术能使生物个体所有细胞内的某个基因不表达或失去活性。此技术可实现　　　　 (　　 )

　 　　 A．特异性删除基因组中某个DNA片段

　 　　 B．产生新的等位基因，从而产生新的基因型

　 　　 C．剔除小鼠的胰岛素基因，研究糖尿病的有效治疗手段及药物

　 　　 D．剔除小鼠的原癌基因，防止细胞发生癌变　　

[知能定位] 本题考查有关基因的技术，属于考纲规定的获取信息等能力层次。

[解题关键] 解答本题的关键是明确题干中基因剔除技术是指生物个体所有细胞内的某个基因。

[答案]C

[解析]剔除技术只是让某个基因不表达或失活，而不是删除；此技术与产生新的等位基因以及基因型没有关系；剔除胰岛素基因，细胞不能合成胰岛素，为研究糖尿病的治疗手段和药物创造了基础，故C项正确；

[易错点击]不能理解基因剔除技术的含义造成误解为特异性删除基因。而选A。

14.(10江苏卷)老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降．某些基因的突变会导致β一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是

A．胚胎移植技术　 　　　　　　　　　　　B．胚胎干细胞技术 　

c．单克隆抗体技术　　　　　　　　　　 D．基因治疗技术

[答案]A

[解析]本题考查了现代生物技术的应用。采用胚胎干细胞技术可以产生新的神经元细胞，单克隆抗体技术定向改善免疫能力，基因治疗技术可以从基因水平对老年痴呆进行治疗，而胚胎移植技术则不能治疗老年痴呆，正确选项为A

　　　 　　　模拟新题

13.(10江苏卷)下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述．错误的是

　 A．对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理

　 B．人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割

　 C．利用胚胎分剖技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎

　 D．一次给受体母羊檀人多个胚胎．可增加双胞胎和多胞胎的比例

[答案]B

[解析]本题考查了胚胎工程及考生理解问题的能力。进行胚胎分割要用囊胚或桑椹胚期的胚胎，B项错误。

11.(10福建卷)[生物-现代生物科技专题]

红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图

(1)图中①所指的是　　　　　 技术。

(2)图中②所指的物质是　　　　　　　　　 ，③所指的物质是　　　　　　　　　 。

(3)培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换　　 　　　　　　　　。

(4)检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的　　　　　　　 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成

答案：(1)PCR　 (2)mRNA　 rhEPO　 (3)培养液　　 (4)杂交瘤

解析：本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、制备单克隆抗体技术。获取目的基因的方法有四种(从基因文库中获取、用PCR扩增技术、用反转录法、用化学合成法)由图以核DNA为模板获得目的基因的方法可知①为PCR技术。进行反转录的模板是mRNA。由题意可知重组CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素(rhEPO)，所以重组CHO细胞能过表达出重组人红细胞生成素(rhEPO)或者红细胞生成素。培养动物细胞是用液体培养基--即培养液，细胞从培养液中吸收营养，并同时向培养液中排放代谢废物，当代谢废物积累时会危害细胞，因此要不断更新培养液。制备单克隆抗体是让淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。

12.(2010山东高考理综)[生物-现代生物科技专题]胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。 (1)从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_____；从良种公牛采集的精子需_____后才能进行受精作用。 (2)在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持____。 (3)图中过程A称为_____，它在胚胎工程中的意义在于_____。 (4)研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是____；获得转基因母牛后，如果_____即说明目的基因已经表达。

[答案]

(1)使卵母细胞成熟(或：使卵母细胞获得受精能力)；　 获能 (2)CO₂ ；　 培养液(基)的pH (3)胚胎移植　 提高优良母畜的繁殖率。

(4)显微注射法　 牛奶中含有人类白细胞介素(或：牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素)

[命题立意]本题综合考查胚胎工程、基因工程等方面知识。