[题目]为了分离和纯化高效分解石油的细菌.科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A所示的实验.(1)步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比.最大的区别是步骤③培养基中 .从功能上讲.步骤③中使用的培养基属于培养基.培养基的灭菌时间应该从开始计时.(2)同学甲进行步骤④的操作.其中．个平板经培养后的菌落分布如图B所示.该同学的接� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A所示的实验。

（1）步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中_______。从功能上讲，步骤③中使用的培养基属于______________培养基。培养基的灭菌时间应该从____________________开始计时。

（2）同学甲进行步骤④的操作，其中．个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是__________________，出现图B结果可能的失误操作是_____________。

（3）同学乙采用平板划线法纯化菌株，培养后的菌落分布如图C，平板中部分菌落越来越稀少，因为是__________________________。

（4）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是_______________________________。

【答案】石油为唯一碳源选择达到设定的温度或压力值稀释涂布平板法涂布不均匀划线过程接种环上的菌种逐渐减少筛选出分解石油能力最好的细菌

【解析】

从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选菌株的过程要使用选择培养基，操作过程中要注意无菌操作，常用的固体培养基上接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法；微生物计数可用稀释涂布平板法和血球计数板计数法。

（1）为筛选出能分解石油的细菌，步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中所以石油是唯一碳源。从功能上讲，步骤③中使用的培养基属于选择培养基。低温常压不能达到灭菌的目的，故培养基的灭菌时间应该从达到设定的温度或压力值开始计时。
（2）接种细菌常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，图B中该同学的接种方法为稀释涂布平板法，出现图B的结果可能是操作过程中涂布不均匀导致的。

（3）根据图示：同学乙采用的接种方法是平板划线法纯化菌株，培养后的菌落分布如图C，平板中部分菌落越来越稀少，因为是划线过程每次划线的菌种都来自上次划线的末端，随划线次数的增加接种环上的菌种逐渐减少，最后形成分散成单个菌，进而繁殖成菌落。

（4）步骤⑤后取样测定石油含量，进一步操作是为筛选出分解石油能力最好的细菌。

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实验组别	实验条件	叶绿素a （mg/cm2）	叶绿素b （mg/cm2）	最大净光合速率（mmolCO2/m2·s）
甲	正常光照，正常供水	1．8×10-2	0．4×10-2	1．9×10-2
乙	弱光照，正常供水	1．7×10-2	0．4×10-2	0．7×10-2
丙	弱光照，减少供水	2．5×10-2	0．7×10-2	0．9×10-2